技術(shù)原理：主要應(yīng)用連接酶檢測(cè)反應(yīng) (ligase detection reaction，LDR)技術(shù)。即在Taq DNA連接酶的作用下, 當(dāng)左右兩條寡核苷酸探針與目的DNA序列完全互補(bǔ)，并且兩條探針之間沒有空隙時(shí)才能發(fā)生連接反應(yīng)，否則連接反應(yīng)不能進(jìn)行，最后通過(guò)熒光掃描片段長(zhǎng)度，根據(jù)測(cè)序峰移動(dòng)的膠位置，通過(guò)末端未標(biāo)記探針的3個(gè)堿基差異，確定同一位點(diǎn)的不同基因型，再通過(guò)末端未標(biāo)記探針的7個(gè)堿基差異，確定不同位點(diǎn)，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)SNP 位點(diǎn)的精確檢測(cè)。
原理及流程示意圖：
PCR-LDR技術(shù)流程：
1. 多重PCR擴(kuò)增：獲得目標(biāo)位點(diǎn)所在的片斷；
2. 多重LDR：得到長(zhǎng)度各異的檢測(cè)產(chǎn)物；
3. 3730測(cè)序儀檢測(cè)：根據(jù)測(cè)序電泳得到不同的峰值；
4. 判斷SNPs結(jié)果，數(shù)據(jù)分析；
方法特點(diǎn)：
1. 通用性強(qiáng)：適用任何多態(tài)性位點(diǎn)和各種SNP位點(diǎn)的分型，不需要人工引入酶切位點(diǎn)；
2. 分型準(zhǔn)確，檢出率高：其準(zhǔn)確度可達(dá)99.2%以上。
3. 檢測(cè)快速：LDR技術(shù)的最大優(yōu)點(diǎn)就是實(shí)驗(yàn)時(shí)間短！與Taqman、RFLP、SSCP和DHPLC相比，由于檢測(cè)條件更易控制，從DNA樣本到數(shù)據(jù)的產(chǎn)出，整體實(shí)驗(yàn)只需要幾周。
適宜范圍：適宜 100-1000個(gè)樣品，1-5個(gè)位點(diǎn)；
訂單點(diǎn)擊下載：SNP基因分型訂單表
客戶需要提供：
1. 細(xì)胞，組織或血液等樣品材料，基因組DNA提取費(fèi)用單獨(dú)收費(fèi)；
2. 基因組DNA（體積≥30μl，濃度≥50 ng/μl），純度 OD260/280 為1.7～1.9之間；
3. 人類基因組需提供SNP位點(diǎn)的RS號(hào)。其它物種如牛、雞、魚等無(wú)rs號(hào)的，需提供SNP位點(diǎn)上下游各200bp的確切序列，SNP位點(diǎn)的突變類型，以及位點(diǎn)的上下游25bp內(nèi)是否存在其它連鎖位點(diǎn)。
最終提交結(jié)果：
1. SNPs結(jié)果（ExceL表格）；
2. 完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告：擴(kuò)增和反應(yīng)體系、所涉及的引物、探針序列；
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