技術(shù)服務(wù)

AFLP是基于PCR技術(shù)擴(kuò)增基因組DNA限制性片段，基因組DNA先用限制性內(nèi)切酶切割，然后將雙鏈接頭連接到DNA片段的末端，接頭序列和相鄰的限制性位點序列，作為引物結(jié)合位點。限制性片段用二種酶切割產(chǎn)生，一種是罕見切割酶，一種是常用切割酶。它結(jié)合了RFLP和PCR技術(shù)特點，具有RFLP技術(shù)的可靠性和PCR技術(shù)的高效性。由于AFLP擴(kuò)增可使某一品種出現(xiàn)特定的DNA譜帶，而在另一品種中可能無此譜帶產(chǎn)生，因此，這種通過引物誘導(dǎo)及DNA擴(kuò)增后得到的DNA多態(tài)性可做為一種分子標(biāo)記。

服務(wù)內(nèi)容：
1. 提供AFLP產(chǎn)物上機(jī)檢測
   客戶提供選擇性擴(kuò)增好的產(chǎn)物，我們提供毛細(xì)管電泳檢測，以及進(jìn)行Size和峰高等分析；

2. AFLP引物篩選
   客戶提供DNA，我們篩選出有多態(tài)性的AFLP引物，供后續(xù)檢測使用；

3. AFLP全套檢測服務(wù)
   提供從DNA的提取，引物篩選到樣本的批量分析全套服務(wù)。

技術(shù)路線：

AFLP反應(yīng)程序主要包括模板DNA制備，酶切片段擴(kuò)增及凝膠電泳分析這3個基本步驟。

具體步驟如下：

1. 首先要制備高分子量(HMW)基因組DNA，選擇6個堿基識別位點的限制性內(nèi)切酶(通常是EcoRI或PstI或SacI)。 
2. 酶切后的限制性片段在T4連接酶的作用下與特定的接頭相連接，形成帶有接頭的特異性片段。
3. DNA片段的預(yù)擴(kuò)增。
4. 在Taq聚合酶的作用下，完成AFLP的選擇性擴(kuò)增。
5. 帶熒光標(biāo)記的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序儀上機(jī)檢測。
6. 多態(tài)性比較分析。

送樣要求：
細(xì)胞（≥106）、組織（≥300mg）、血液（≥1ml）、基因組DNA（體積≥20μl，濃度≥ 50 ng/μl）

提供結(jié)果：
原始數(shù)據(jù)、引物序列、實驗報告、PDF格式毛細(xì)管電泳圖譜和EXCEL格式片段長度。