技術(shù)服務(wù)

一、服務(wù)介紹：

Southern印跡雜交（Southern blot）是1975年由英國人southern創(chuàng)建，是研究DNA圖譜的基本技術(shù)，在遺傳病診斷、DNA圖譜分析及PCR產(chǎn)物分析等方面有重要價值。

Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的方法。其原理為利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段，將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上，經(jīng)干烤或者紫外線照射固定，再與相對應(yīng)結(jié)構(gòu)的DIG標記探針進行雜交，用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色，從而檢測特定DNA分子的含量。

本公司使用最先進的自動化學(xué)發(fā)光成像檢測系統(tǒng)進行曝光，確保捕獲最佳信噪比的成像時間點，獲得較高質(zhì)量的圖片，圖片可以直接用于SCI論文發(fā)表使用，達到國際期刊的要求。 

  本公司的Southern雜交技術(shù)可以檢測各種動物植物 微生物的基因組片段，探針的制作使用DIG（地高辛）標記，具有標記效率高，背景噪音少、無放射性污染的特點。本公司在實驗過程中保留原始數(shù)據(jù)，原始照片和實驗材料，數(shù)據(jù)真實可信，具有可重復(fù)性。

服務(wù)流程：
1.基因組DNA提?。▎为毷召M）
2.探針設(shè)計合成（單獨收費）
3.DIG探針標記
4.Southern雜交檢測
5. 提交給您電子版檢測報告，包括詳細操作程序和實驗結(jié)果等

二、服務(wù)報價：

Southern Blot檢測，如果重復(fù)2次實驗仍結(jié)果不理想（背景深等），將收取5000元/膜的基礎(chǔ)費用。
重復(fù)雜交，如果重復(fù)2次實驗仍結(jié)果不理想（背景深等），將收取3000元/膜的基礎(chǔ)費用。

三、客戶提供材料：

1.用于實驗，Southern雜交的高質(zhì)量DNA樣品質(zhì)量至關(guān)重要，決定實驗的結(jié)果的成敗。建議委托本公司提取，以便于提高效率節(jié)省時間。

2.基因組DNA檢測：OD260/OD280=1.8-2.0，基因組要求DNA總量不小于60ug，濃度大于500ng/uL；客戶需要提供基因組DNA檢測圖片以及NANO Drop 2000等檢測儀的檢測結(jié)果，要求無降解，無蛋白污染，電泳檢測標準請參考。

3.檢測樣品低溫運輸至公司，最可靠選擇干冰，順風(fēng)快遞運輸。

4.客戶需提供用于雜交的目標基因序列和含有待雜交基因的陽性質(zhì)粒（50uL以上），我們會依據(jù)Southern blot實驗要求重新選擇全長或部分區(qū)域作為探針序列，標記地高辛探針。

5.客戶如果無法提供高品質(zhì)的，達到實驗要求的基因組DNA樣品，本公司可以幫助制備可用于Southern Blot檢測的DNA樣品，客戶需要提供足夠量的組織樣品，細胞樣品或者菌液樣品（建議干冰順豐快遞運輸）。

6.客戶需要選擇合適的DNA內(nèi)切酶將基因組DNA片段化，即彌散化結(jié)果。如果實驗需要用到非常規(guī)的限制性內(nèi)切酶或者需要本公司進行選擇，需額外加收酶切費用和設(shè)計費用，并且客戶需提供 實驗中用到的一系列基因序列信息。 

四、實驗流程:

1.制備待測DNA

2.DNA限制酶消化 

3.瓊脂糖凝膠電泳分離待測DNA樣品 

4.電泳凝膠預(yù)處理

5.轉(zhuǎn)膜

6.探針標記 

7.預(yù)雜交

8.Southern雜交

9.洗膜

10.放射性自顯影檢測 

11.實驗結(jié)果分析及報告

五、提供結(jié)果:

本公司負責(zé)對客戶提供樣品進行DIG探針標記與Southern雜交檢測技術(shù)服務(wù)，最終提供檢測報告及檢測圖片。

1、DNA樣品檢測報告（實驗樣品不返還，請注意保留備份）

2、標準實驗流程報告

3、southern blot實驗結(jié)果檢測報告

4、如果是實驗有額外的要求，請?zhí)崆爸码娀蜞]件進行溝通說明。