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無(wú)血清細(xì)胞凍存液

簡(jiǎn)單/安全/高效，無(wú)需液氮，低溫冰箱直接凍存

特別配方有效提高細(xì)胞凍存存活率和復(fù)蘇活力。不含血清，不含動(dòng)物來(lái)源蛋白，能減少各類病毒，霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全。通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株，既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，也適用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。操作簡(jiǎn)便，直接放入-70℃以下冰箱長(zhǎng)期保存。

凍存方法比較：

產(chǎn)品特色與優(yōu)勢(shì)：

1.不含血清和動(dòng)物來(lái)源的蛋白，安全穩(wěn)定

（1）降低了動(dòng)物血清來(lái)源病毒，霉菌和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn)，確保凍存細(xì)胞的安全。

（2）對(duì)于已適應(yīng)了無(wú)血清培養(yǎng)的細(xì)胞來(lái)說(shuō)，避免了血清的帶入和細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的改變（如懸浮培養(yǎng)細(xì)胞恢復(fù)貼壁狀態(tài)）。

（3）動(dòng)物血清成分復(fù)雜，個(gè)體差異大，且生產(chǎn)來(lái)源不穩(wěn)定，因此批次間質(zhì)量常常不穩(wěn)定，影響培養(yǎng)細(xì)胞的狀態(tài)，無(wú)血清凍存液成分和配比明確，批次間幾乎無(wú)差異，能夠保證生長(zhǎng)細(xì)胞狀態(tài)的穩(wěn)定。

2.即用型，方便快捷，無(wú)需液氮，無(wú)需分步降溫，只需要加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，即可長(zhǎng)期保存，凍存和復(fù)蘇操作，安全簡(jiǎn)單。

3.低溫冰箱長(zhǎng)期保存，對(duì)凍存設(shè)備要求低，對(duì)凍存管的要求低，普通材質(zhì)的螺口管即可，安全可靠，只需-70-80℃冰箱，對(duì)設(shè)備要求低。

4.整塊細(xì)胞培養(yǎng)板凍存，省時(shí)高效：

對(duì)于用細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)的細(xì)胞，例如雜交瘤篩選過(guò)程，如果想要暫時(shí)保存整板克隆，只需直接棄去整板培養(yǎng)液，加入適量快速凍存液，密封培養(yǎng)板邊緣，再置于-80℃冰箱即可，復(fù)蘇時(shí)直接將培養(yǎng)板置37℃培養(yǎng)箱解凍后換新鮮培養(yǎng)基即可恢復(fù)培養(yǎng)，細(xì)胞狀態(tài)幾乎不受影響。適合各種型號(hào)細(xì)胞培養(yǎng)板（如96孔，48孔，6孔，平皿等）。

保存條件：

儲(chǔ)存于4℃以下，質(zhì)保期3年。3個(gè)月以上沒(méi)有使用凍存液計(jì)劃時(shí)，盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過(guò)程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低，推薦將100 ml產(chǎn)品分裝小瓶后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。

細(xì)胞冷凍保存方法：

選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。

1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。

2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。

（參考：5×105至5×106cells/ml）。

3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm，4℃，3~5 min）。移去離心管中的上清液。

4.加入適量的無(wú)血清型細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細(xì)胞混合液。

5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。

6.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長(zhǎng)期冷凍保存。

7.若研究者需要液氮保存時(shí)，可將完全凍結(jié)的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。

凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法：

1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管，立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。

2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。

3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm，4℃，3~5 min），移去上清液。

4.清洗細(xì)胞，充分洗凈殘留凍存液。

5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。

6.鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來(lái)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。