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Taq DNA Polymerase

包裝規(guī)格：

      Taq DNA Polymerase 是從克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表后分離純化的，其分子量為94 KD。Taq DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′外切核酸酶活性，無(wú)3′-5′外切酶活性。在PCR反應(yīng)中，Taq DNA Polymerase延伸速度為1-2 kb/分鐘，產(chǎn)物3′端帶A，可直接用于T/A載體克隆。

活性單位：
單位（U）Taq DNA Polymerase 活性定義為在74℃、30分鐘內(nèi)，以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板引物，將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。

存儲(chǔ)：-20℃保存

質(zhì)量控制：

SDS-PAGE 檢測(cè)純度大于99%，經(jīng)檢測(cè)無(wú)外源核酸酶活性；PCR方法檢測(cè)無(wú)宿主殘余DNA，能有效地?cái)U(kuò)增人基因組中的單拷貝基因；

室溫存放一周，無(wú)明顯活性改變。

酶儲(chǔ)存緩沖液：

20mMTris-HCl (pH8.0)，0.1 mMEDTA，1mMDTT，100 mMKCl，Stabilizers，50% glycerol。

10×Taq Buffer (含Mg2+)：

200 mMTris-HCl (pH 8.4)，200 mMKCl，100 mM(NH4)2SO4，15 mMMgCl2，其他成分。

★  10×TaqBuffer分為含Mg2+和不含Mg2+兩種，可自選。

★ 不含Mg2+的Buffer，另外配有25 mMMgCl2。

★ 如果沒有特別指定，通常提供的為含有Mg2+的Buffer。

適用范圍：

一般用于DNA片斷的PCR擴(kuò)增、DNA標(biāo)記、引物延伸、序列測(cè)定、平末端加A等，產(chǎn)物可以直接用于T/A載體克隆。

建議的PCR條件： (以50 μl反應(yīng)體系為例)

Template　                                    ＜0.5 μg

Forward Primer (10 μM)　                    1 μl

Reverse Primer (10 μM)　                    1 μl

10×Buffer+（with mgcl2）        　      5 μl

dNTP Mixture(各2.5mM)  　　             4 μl

Taq DNA polymerase(5U/μl)            0.5～1 μl

dH2O                                          up to 50 μl