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CRISPR/Cas系統(tǒng)核酸檢測試紙條

CRISPR/Cas system Nucleic Acid Test Strips

【工作原理】

本產品采用層析式雙抗體夾心法快速檢測核酸擴增CRISPR/Cas系統(tǒng)酶切產物。用戶僅需在探針設計時將一端標記生物素（Biotin），另一端標記異硫氰酸熒光素（FITC）或 6-羧基熒光素（6-FAM）。

測試時，將試紙條插入待檢樣本。樣本中含有的帶有標記物的核酸探針首先與膠乳標記的抗核酸標記物抗體結合，隨后結合物在毛細效應下向上層析，樣本中未被酶切的核酸探針會被固定在C 線與抗核酸標記物配體結合，在質控區(qū)（C）會出現(xiàn)一條紅色條帶，樣本中被酶切的核酸探針會被固定在 T 線與二抗結合，在檢測區(qū)（T）會出現(xiàn)一條紅色條帶。當樣本中所有核酸探針都被酶切后，質控區(qū)（C）將不顯色。

【預期用途】 

本產品用于檢測目的基因RPA、LAMP、PCR擴增后的CRISPR/Cas系統(tǒng)酶切產物，適用于野外現(xiàn)場，快速試紙條檢測。

【包裝規(guī)格/貨號】

貨號：A4631-50

包裝規(guī)格：1條/盒×50條，鋁箔袋防潮包裝。

【儲存條件及有效期】

儲存條件：存放于避光干燥處，儲存溫度4~30℃。有效期：12個月。

【操作步驟】

1. 根據(jù)檢測樣品數(shù)量取出相應數(shù)量的試紙條，并在試紙條上做好標記。每根試紙條只能用于單次、單個樣品的檢測。

2. RPA、LAMP、PCR擴增后經CRISPR/Cas系統(tǒng)酶切的擴增產物，用帶濾芯的吸頭取適量擴增產物到新的PCR管中，用超純水或者稀釋液(Tris-HCL 0.05M，pH8.0)稀釋5-50倍，根據(jù)實際情況選擇合適緩沖液，摸索最佳稀釋倍數(shù)，吹打混勻后進行檢測。

3. 在PCR管中將擴增產物稀釋到60 uL，將試紙條結合墊端插入PCR管中，液面不高于標示線。

4. 根據(jù)試紙條顯色情況直接讀取檢測結果，質控線（C線）顯色后2-5min內觀察結果，超過5分鐘判讀無效。

5. 記錄檢測結果，將試紙條密封丟棄在安全處。

【結果判讀】

1. 陽性（+）：

試紙條質控線（C 線）和檢測線（T 線）均出現(xiàn)紅色條帶；試紙條質控線（C 線）不顯色，檢測線（T 線）出現(xiàn)紅色條帶。上述兩種情況均說明 CRISPR/Cas 可進行有效切割，并激活報告基團顯色，結果均可判定為陽性。

注意：當探針濃度過低或沒有加入探針時，無論是否酶切，測試結果會顯示為陽性，應提高探針濃度再測試。

2. 陰性（-）：

試紙條質控線（C 線）出現(xiàn)一條紅色條帶，檢測線（T 線）不顯色，判定為陰性結果。該結果表明 CRISPR/Cas 未能切割報告分子，未能激活報告基團顯色。

3. 無效：

試紙條質控線（C 線）和檢測線（T 線）均未出現(xiàn)條帶，提示所用的試紙條或擴增試劑可能已經損壞、失效或操作有誤。

此時，應仔細閱讀說明書，重新擴增和檢測。如果問題仍然存在，應立即停止使用同一批號的產品，并與廠家聯(lián)系。

【注意事項及安全提示】

1. 本產品僅供科研使用。使用前請仔細閱讀說明書，嚴格按照說明書操作。違反或者未按說明書進行操作可能導致錯誤結果。

2. 產品應依照說明書要求，儲存于合適的環(huán)境和溫度下，并在有效期內使用。儲存不當或產品過期可能導致錯誤結果。打開包裝后請盡快使用試紙條，以免因試紙條受潮影響試驗結果。檢測環(huán)境光線不足，操作者色弱等因素均可能能導致錯誤結果。

3. 使用完畢后，應盡快將紙條裝進密封袋，妥善處理。本產品為一次性使用產品，請勿重復使用。