技術(shù)服務(wù)

在細(xì)胞生物學(xué)研究中，有時(shí)要對(duì)細(xì)胞膜分子、胞內(nèi)分子或表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行定性或／和定量。但由于靶蛋白表達(dá)水乎不太高，用細(xì)胞裂解液或表達(dá)上清進(jìn)行SDS-PAGE電泳、免疫印跡（Western blot）檢測(cè)很難達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。為此可用特異性識(shí)別靶蛋白的抗體進(jìn)行免疫沉淀，純化和富集靶抗原。免疫沉淀所獲得的蛋白可進(jìn)行SDS－PAGE電泳，經(jīng)考馬氏亮藍(lán)染色或銀染后觀察目的蛋白條帶。如果免疫沉淀得到的目的蛋白量低于考馬氏亮藍(lán)染色或銀染的檢測(cè)下限，可采用 Western blot檢測(cè)方法，提高檢測(cè)的靈敏度，達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/span>

免疫沉淀是利用抗原蛋白和抗體特異性結(jié)合，以及細(xì)菌蛋白prorein A/G可特異地結(jié)合到抗體的FC片段的原理衍生出來(lái)的實(shí)驗(yàn)方法。目前多用預(yù)先結(jié)合了protein A/G的sepharose。免疫沉淀的成功依賴(lài)于抗原的純度以及制備抗原的難易，主要受兩方面因素的影響：1抗原原液的豐度；2抗體對(duì)抗原的親和力。有3種類(lèi)型的抗體可用于免疫沉淀：多克隆抗體，混合單克隆抗體和單克隆抗體。

免疫共沉淀優(yōu)點(diǎn)：
1）相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài)； 
2）蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的，可以避免人為的影響； 
3）可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。 

免疫共沉淀缺點(diǎn)：
1）可能檢測(cè)不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用； 
2）兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合，而可能有第三者在中間起橋梁作用； 
3）必須在實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)目的蛋白是什么，以選擇最后檢測(cè)的抗體，所以，若預(yù)測(cè)不正確，實(shí)驗(yàn)就得不到結(jié)果，此方法具有一定的風(fēng)險(xiǎn)性。

服務(wù)內(nèi)容：

1. 樣品處理；
2. 樣品、抗體與Protein A/G sepharose孵育；
3. 抗原、抗體與Protein A/G sepharose復(fù)合物洗滌；
4. 沉淀產(chǎn)物鑒定。

樣品要求：
1. 待檢測(cè)樣品：可以是直接的待檢測(cè)蛋白樣品，也可以是細(xì)胞、組織或細(xì)菌樣品，但需收取蛋白抽提費(fèi)用； 
2. 免疫沉淀用抗體；
3. 檢測(cè)用抗體。

交付材料：
檢測(cè)結(jié)果及實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

價(jià)格體系：

IP：2600元/膜

CoIP：3600元/膜