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      DNA測(cè)序

      由于ddNTP無(wú)法與后續(xù)的dNTP形成磷酸二酯鍵,從而使正在擴(kuò)增的DNA鏈終止延伸。若在DNA擴(kuò)增體系中加入帶有不同熒光的四種ddNTP(ddATP,ddGTP,ddCTP,ddGTP) 在一定時(shí)間后就會(huì)形成一組長(zhǎng)度遞減(遞增)一個(gè)堿基且?guī)в兴姆N不同熒光標(biāo)記的DNA片斷。通過(guò)電泳可以區(qū)分長(zhǎng)度不同的DNA片斷,通過(guò)識(shí)別四種不同的熒光來(lái)讀出四種不同的堿基,從而測(cè)定DNA序列。

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      由于ddNTP無(wú)法與后續(xù)的dNTP形成磷酸二酯鍵,從而使正在擴(kuò)增的DNA鏈終止延伸。若在DNA擴(kuò)增體系中加入帶有不同熒光的四種ddNTP(ddATP,ddGTP,ddCTP,ddGTP) 在一定時(shí)間后就會(huì)形成一組長(zhǎng)度遞減(遞增)一個(gè)堿基且?guī)в兴姆N不同熒光標(biāo)記的DNA片斷。通過(guò)電泳可以區(qū)分長(zhǎng)度不同的DNA片斷,通過(guò)識(shí)別四種不同的熒光來(lái)讀出四種不同的堿基,從而測(cè)定DNA序列。


      測(cè)序引物要求:
      1.引物長(zhǎng)度最好在20bp左右;
      2.不能含有特殊結(jié)構(gòu);
      3.引物濃度要≥5P。

      客戶需要提供:
      1.提前準(zhǔn)備送測(cè)樣本,以便節(jié)約取樣時(shí)間;
      2.請(qǐng)?jiān)敿?xì)填寫(xiě)測(cè)序樣本登記表。以便及時(shí)與您溝通。
      (測(cè)序樣品登記表詳見(jiàn)下載區(qū))

      我們提供的服務(wù):
      1.接收菌株、質(zhì)粒、PCR樣本。
      2.PCR、質(zhì)粒樣本次日出結(jié)果,菌株隔日出結(jié)果。
      3.免費(fèi)提供引物設(shè)計(jì)及建議,拼接序列,引物單獨(dú)收費(fèi);

      特別說(shuō)明:
      1.菌株:新鮮菌液易于培養(yǎng),可以獲得更多的DNA,同時(shí)更大限度保證菌種的純度。
      a.需過(guò)夜培養(yǎng)的菌液:提供的量不少于200ul;
      b.無(wú)需培養(yǎng)的菌液:提供的量不少于3~4ml(已培養(yǎng)好的);
      c.長(zhǎng)途運(yùn)輸盡量提供穿刺菌;
      d.暫不接收酵母菌。

      2.質(zhì)粒:
      a.請(qǐng)務(wù)必溶于滅菌的雙蒸水中。(不要溶于TE中);
      b.檢測(cè)濃度大于100ng/ul濃度;不少于10ul以上。(1~2個(gè)反應(yīng))。

      3.PCR產(chǎn)物:
      a.已純化的PCR請(qǐng)務(wù)必溶于滅菌的雙蒸水中,不少于10ul以上。(1~2個(gè)反應(yīng));
      b.未純化的PCR不少于20ul(單一條帶),需切膠回收的樣本不少于40ul,且在訂單中注明。
      Genenode|君諾德公司

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